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使用固相萃取技術(shù)時(shí)的注意事項(xiàng)

  • 更新日期:2023-02-01      瀏覽次數(shù):1715
    • 1.盡量慢。
      我們在用固相萃取儀時(shí),面臨的一個(gè)問題就是:液體應(yīng)該以什么速率過柱流出,我的經(jīng)驗(yàn)是,要想效果好,就要慢,盡量慢。.
      對于固相萃取儀柱中的填料,我們?nèi)绻植糠糯蟮乜?,能夠看到其?shí)它們是有很多的空際,液體流通的渠道很多,如果流得快,相當(dāng)比例的待測組分還來不及與填料充分作用就地從通道流失;所以要慢,給它們一個(gè)充分作用的機(jī)會(huì)。
      如何慢呢?一個(gè)竅門就是不要用配合抽氣機(jī)使用的所謂固相萃取儀器,而采用再普通不過的重力法。利用重力的作用使液體向下流出。在實(shí)驗(yàn)速度上,重力法遠(yuǎn)不如吸力法,但是在實(shí)驗(yàn)效果方面,重力法遠(yuǎn)比吸力法優(yōu)勝,用吸力法只能得到譜帶吸附,用重力法卻能得到柱頭吸附,在速度和效果兩者的平衡中,我們還是傾向于優(yōu)先保證好的效果。
      舉例來說,一個(gè)3ml500mg的C18小柱,如果加甲醇活化,其甲醇全部流至篩板時(shí)間約為20分鐘,而在過樣品液時(shí),25ml 的液體*多2小時(shí)可以流完,而且用重力法如果得當(dāng),工作速率不比吸力法差很多。因?yàn)槲覀兛梢猿浞掷每臻e時(shí)間,用吸力法*須有人在旁邊守候,而重力法由于不需要用電,可以充分利用午休和晚上時(shí)間過柱,液體量大時(shí)接個(gè)堆疊接頭和延長管即可,安排好實(shí)驗(yàn)步驟,工作效率一樣很高。另外,重力法不需要抽氣機(jī)和固相萃取儀器。
      2.盡量少。
      在固相萃取儀條件選擇上,有人為了提高提取效率,盡量多加液體,或選擇填料量大的小柱,我覺得大可不*如此。尤其在用重力法時(shí),由于效率高,很多情況下是柱頭吸附,并不是所有的填料都在起作用,填料多了不僅液體流出速度會(huì)更慢,而且在洗脫時(shí)的擴(kuò)散會(huì)很明顯。
      n. com因此建議,夠用就行,在能保證效率時(shí),填料盡量少,加液也不宜多。
      3.實(shí)驗(yàn)條件不宜過分細(xì)化。
      固相萃取儀從原理上是色譜分離,但是在操作時(shí)*好只把它作為吸附萃取劑使用,由于填料性質(zhì)、松緊常有差異,因此在實(shí)際實(shí)驗(yàn)中不*因?yàn)樽非笮Ч?佳化而設(shè)計(jì)出很復(fù)雜的洗脫程序。
      在建立條件中,我們應(yīng)該盡量多利用現(xiàn)成的資料,盡快地建立起體系,同時(shí)要對操作過于復(fù)雜的步驟保持警惕性,在實(shí)驗(yàn)效果,實(shí)驗(yàn)速率和易操作性三者中取得平衡點(diǎn)。
      4.只用一次
      固相萃取儀柱*好只用一.次。因?yàn)閺膰?yán)格的意義上來說,很多物質(zhì)的吸附是不可逆的,一次吸附, 無法洗脫,影響著下一次吸附,雖然有人做過重復(fù)利用的實(shí)驗(yàn),但是總體來說為了節(jié)省- -點(diǎn)經(jīng)費(fèi)而大大增加了結(jié)果的不可靠性和不確定性,是很不合算的行為。

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